我們在使用流式細胞儀檢測外周血單個核細胞（peripheral blood mononuclear cell，PBMC)時，是不是常會發(fā)現(xiàn)CD3+T細胞的比例稍高與CD4+T細胞與CD8+T細胞的比例之和？這是因為在CD3+T細胞中，不僅含有CD4+CD8-T細胞和CD4-CD8+T細胞，還含有少量的CD4+CD8+T細胞和CD4-CD8-T細胞，如圖一。
圖1 PBMC流式分析
那么，我們現(xiàn)在先來認識一下CD3+CD4-CD8- T細胞到底是什么細胞？
CD3+CD4-CD8- T細胞主要有兩類：一類是CD4-CD8-雙陰性T細胞（Double negative T cell，DNT細胞），另一類是γδ T細胞。這兩類T細胞的共同特點是都不表達CD4與CD8（少數(shù)位于腸道的γδ T細胞可能表達CD8α）；不同點在于細胞表面的TCR不同，DNT細胞的TCR是由α和β兩條肽鏈組成的，而γδ T細胞的TCR是由γ和δ兩條肽鏈組成的，如圖2。因此，DNT細胞的表型是TCRαβ+CD3+CD4-CD8-，而γδ T細胞的表型則是TCRγδ+CD3+CD4-CD8-。
圖2 T細胞分化發(fā)育過程（圖來源網(wǎng)絡）
（1）DNT細胞屬于T細胞的一種亞型，在正常人體內，DNT細胞數(shù)量極少，僅占外周T淋巴細胞的1%-2%。對于DNT細胞的起源，研究雖多，卻未有定論。根據(jù)研究成果，總結出DNT細胞的來源包括：
①DNT細胞可以通過胸腺內特殊途徑分化成熟；②DNT細胞經過非胸腺途徑的內分化途徑成熟；③DNT細胞經過特殊環(huán)境由外周T細胞直接分化而來；④因為可能存在不同亞型的DNT細胞，所以可能存在多種不同的成熟細胞通路和分化途徑。DNT細胞來源不同，其所產生的細胞因子亦不同。胸腺來源的DNT細胞產生大量的IL-10，而從血液或外周淋巴器官獲取的DNT細胞并不產生IL-10，而是分泌大量的IFN-γ、TNF-α和微量的TGF-β。
（2）DNT細胞具有調節(jié)免疫應答能力。DNT細胞不僅在自身免疫性疾病和器官移植免疫方面起著重要作用，還具有抗腫瘤作用。例如，在自身免疫性淋巴增生綜合征（ALPS）中，DNT細胞明顯增高。在ALPS的診斷標準中，其中一個必需標準是淋巴細胞計數(shù)正?；蚵栽龈?，但CD3+TCRαβ+CD4-CD8- 雙陰性T細胞比例增高（≥總淋巴細胞的1.5％，或≥CD3＋淋巴細胞的2.5％）。DNT細胞在系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）的病人中高于正常水平，且可產生IL-4和IFN-7。這些功能類似Th的DNT細胞可協(xié)助CD1c B細胞產生IgG。DNT細胞可通過Fas/FasL途徑、顆粒酶/穿孔素途徑和分泌細胞因子等方式來殺傷腫瘤細胞。此外，DNT細胞在體外被激活后可產生IL-4和IL-10，這顯示其可能具有一定的抑制性免疫調節(jié)功能。
（3）γδ T細胞是一類不同于αβ T細胞的T細胞亞群，占T淋巴細胞的1%-10%。γδ T細胞主要分布于外周血以及腸道、呼吸道、泌尿生殖道等黏膜組織和皮膚，外周血中的γδ T細胞約占人體總γδ T細胞的90%以上。γδ T細胞多為CD4-CD8-表型，但位于腸上皮內的γδ T細胞會表達輔助受體CD8α。γδ T細胞在生物進化上比傳統(tǒng)的αβ T細胞早出現(xiàn)，可能在生物進化出適應性免疫的早期就出現(xiàn)γδ T細胞了，因此γδ T細胞既保留了先天性免疫的特性，又有適應性免疫的特性，被認為是先天性免疫和適應性免疫的“橋梁”。
γδ T細胞有獨特的抗原受體，識別抗原不受MHC限制，主要識別CD1分子提呈的糖脂、某些病毒的糖蛋白、分枝桿菌的磷酸糖和核苷酸衍生物等，因此γδ T細胞是一類CD1限制性T細胞?；罨摩忙?T細胞可通過釋放穿孔素、顆粒酶和表達FasL等方式殺傷病毒感染細胞和腫瘤細胞，還可分泌IL-17、INF-γ和TNF-α等細胞因子來發(fā)揮免疫調節(jié)作用和介導炎癥反應。早在1989年，已有報道指出γδ T細胞參與機體對結核分枝桿菌( Mycobacterium tuberculosis，Mtb) 的免疫應答，γδ T細胞被認為在抗分枝桿菌免疫中起關鍵作用，在Mtb感染后，受到Mtb抗原刺激的γδ T細胞迅速發(fā)生活化，發(fā)揮保護性免疫的作用。
雖然γδ T細胞在外周血中數(shù)量很少，但結核桿菌低分子多肽抗原、熱休克蛋白70多肽、異戊烯焦磷酸（IPP）和帕米磷酸鈉（PAM）等均可有效地誘導γδ T細胞發(fā)生增殖，IL-2具有協(xié)同對γδ T細胞的促增殖作用。
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